تعداد نشریات | 161 |
تعداد شمارهها | 6,532 |
تعداد مقالات | 70,501 |
تعداد مشاهده مقاله | 124,098,063 |
تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 97,205,640 |
افزایش ارتفاع و سطح برگ گیاهان تراریخت توتون بیانکنندۀ ژن AtEXPA18 آرابیدوپسیس تالیانا | ||
علوم گیاهان زراعی ایران | ||
مقاله 7، دوره 45، شماره 3، مهر 1393، صفحه 389-398 اصل مقاله (687.54 K) | ||
نوع مقاله: مقاله پژوهشی | ||
شناسه دیجیتال (DOI): 10.22059/ijfcs.2014.53535 | ||
نویسندگان | ||
میثم ملک پور1؛ علیرضا عباسی* 2 | ||
1کارشناس ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی، پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران | ||
2دانشیار، پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران | ||
چکیده | ||
اکپنسینها گروهی از پروتئینهای دیوارۀ سلولیاند که بهواسطۀ تغییرات pH، موجب بسط دیوارۀ سلولی میشوند. این پروتئینها از طریق سست کردن پیوندهای هیدروژنی بین میکروفیبریلهای سلولز و پلیمر ماتریکس موجب تغییر شکل دیواره و رشد میشوند. در این تحقیق، یک ژن اختصاصی ریشه از گیاه آرابیدوپسیس به نام AtEXPA18 که بهطور مستقیم در شکلگیری ریشههای مویین مؤثر است، همچنین نقش آن در دیگر بخشهای گیاهی ثابت شده است، جداسازی و تحت کنترل پیشبرندۀ CaMV 35S و خاتمهدهندۀ NOS درون ناقل بیان گیاهی pBI121 همسانهسازی و در نهایت به آگروباکتری منتقل شد. سپس این ژن طی روش تراریختی برگی توتون، به این گیاه انتقال یافت. گیاهان حاصل از باززایی روی محیط انتخابی حاوی کانامایسین گزینش شدند. گیاهان بهدستآمده از این طریق در نهایت به گلخانه انتقال یافتند و پس از رشد کافی مورد آنالیز مولکولی و مورفولوژیکی قرار گرفتند. برای اثبات تراریختی گیاهان در سطح ژنوم، استخراج دیانای صورت گرفت و ژن AtEXPA18 با استفاده از آغازگرهای اختصاصی طراحی شده و از طریق واکنش زنجیرهای پلیمراز تکثیر شد. همچنین پس از استخراج RNA و ساخت cDNA، نتایج آزمون RT-PCR، رونویسی تراژن را در گیاهان تراریخت تأیید کرد. بررسیهای مورفولوژیکی گیاهان تراریخت نشان داد که این گیاهان نسبت به گیاهان غیرتراریخت دارای اندامهای بزرگتر و حجیمتری هستند. برای مثال صفاتی همچون ارتفاع بوته و سطح برگها، در توتونهای تراریخت نسبت به گیاهان شاهد، برتری معنیداری داشتند. نتایج بهدستآمده بههمراه سایر نتایج، نقش ژن مذکور را در بسط و توسعۀ سلولی نشان میدهند و آن را بهعنوان تنظیمکنندۀ رشد عمومی، برای بهدست آوردن گیاهان تراریخته با اندام بزرگتر توصیه میکنند. | ||
کلیدواژهها | ||
اکسپنسین؛ اگروباکتریوم تومفشینس؛ بسط دیوارۀ سلولی؛ تراریختی | ||
عنوان مقاله [English] | ||
Increasing stems length and leaf area in transgenic tobacco plants expressing Arabidopsis AtEXPA18 gene | ||
نویسندگان [English] | ||
Meysam Malekpour1؛ Alireza Abbasi2 | ||
1M.Sc. graduate of Agricultural Biotechnology, University of Tehran | ||
2Associate Professor, University College of Agriculture & Natural Resources, University of Tehran, Karaj | ||
چکیده [English] | ||
Expansins are cell wall proteins that due to changes in pH, causing the expansion of the cell wall .These proteins are causing deformation of walls through loosening hydrogen bonds between the cellulose and polymer matrix microfibrils .In this study, a root specific gene called AtEXPA18 -that directly affect the formation of root hairs and also its role have been proved in other parts of the plant- was isolated from Arabidopsis thaliana and cloned into the plant expression vector PBI121 under the control of CaMV 35S promoter and NOS terminator and finally was transferred to Agrobacterium .This gene was then transferred to the tobacco through leaf disks transformation. Plants obtained from regeneration was selected on selective medium containing kanamycin .Plants were transferred to the greenhouse and after growth, molecular and morphological analysis was conducted .To prove the transformation of plants in genome wide ,DNA was extracted and AtEXPA18 gene was amplified by polymerase chain reaction technique with specific primers. Also, the results of RT-PCR confirmed the transcription of transgene in transgenic tobacco, after RNA extraction and cDNA synthesis. The obtained transgenic tobacco plants were shown to have significantly larger leaves and longer stems compared to control plants. The results obtained with other results demonstrate the role of mentioned gene in cell expansion and recommend it as a public growth regulator to obtain transgenic plants with larger organs. | ||
کلیدواژهها [English] | ||
Expansin, Agrobacterium tumefaciens, cell wall expansion, Transformation | ||
مراجع | ||
| ||
آمار تعداد مشاهده مقاله: 1,709 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1,030 |