پیوندهای مفید
اخبار و اعلانات
آمار
| تعداد نشریات | 161 |
| تعداد شماره‌ها | 6,532 |
| تعداد مقالات | 70,502 |
| تعداد مشاهده مقاله | 124,117,697 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 97,223,425 |
تولید یک سویه جهش یافته مقاوم نسبت به شوریEscherichia Coli-MK 148 و جداسازی ژنهای باکتریایی بیوسنتز پرولین از آن | ||
| مجله علوم دانشگاه تهران (منتشر نمی شود) | ||
| مقاله 1، دوره 1، شماره 0 - شماره پیاپی 1324، بهمن 1380 اصل مقاله (2.52 M) | ||
| نویسندگان | ||
| اشرف‌الدین سخن‌سنج؛ ناهیدکرامت* | ||
| چکیده | ||
| یکی از عوامل مهم در ایجاد مقاومت در برابر تنش‌های اسمزی ( خشکی و شوری) در محیط تولید و تراکم ترکیبات محافظ اسمزی نظیر اسیدهای آمینه پرولین، گلیسین و گلیسین بتائین، موادی نظیر پینیتول، مانیتول و همچنین پروتئینهای HSP توسط سلولهای موجودات زنده می‌باشد. از طرفی مسیر بیوسنتز این ترکیبات در گیاهان و باکتریها دارای طرح مشابهی است، بنابراین با انتقال ژنهای دست‌ورزی شده مؤثر در تولید این گونه مواد به گیاهان می‌توان لاین‌های ترانس ژن مقاوم به تنش اسمزی ایجاد نمود. در این تحقیق از پرتودهی توسط اشعة گاما که دارای خاصیت تک فامی و نفوذپذیری انتخابی می‌باشد، جهت ایجاد جهش در باکتری Escherichia coli- MK 148 استفاده گردید. کلنی‌های مقاوم به شوری به دست آمده و جداسازی گردیدند. سویه‌های حاصل تا 600 میلی مولار نمک در محیط کشت را تحمل کرده و قادر به رشد و تولید مثل بودند. ایجاد مقاومت به شوری باید همراه با جهش در ژن مربوط به آنزیم گلوتامیل کیناز باشد که اولین آنزیم در مسیر بیوسنتز پرولین است حساسیت آنزیم بعد از ایجاد جهش در ژن مربوط به آن نسبت به کنترل فیدبک توسط محصول انتهایی کاهش یافته است. ژنهای مربوط به آنزیم گلوتامیل کیناز (proB) و آنزیم گلوتامیک سمی آلدئید دهیدروژناز (proA) توسط روش PCR از سویه مقاوم به شوری جدا شده و در پلاسمید pUC 19 کلون شدند. این پلاسمید باعث رشد باکتریهای فاقد توانایی بیوسنتز پرولین در محیط فاقد پرولین و دارای شوری گردیدند. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| پرولین؛ ترکیب محافظ اسمزی؛ تنش اسمزی؛ تنش‌شوری؛ گلوتامیک سمی آلدئید دهیدروژناز؛ گلوتامیل کیناز؛ مقاومت‌اسمزی؛ مقاومت به شوری | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| - | ||
| چکیده [English] | ||
| One of the important factors leading to osmotolerance (drought and salinity) is accumulation of osmoprotectors such as amino acids: Proline, glyicine and glycine betaine; compounds like manitol and pinitol and also HSP proteins by cells of living organisms. The biosynthetic pathways of these products are similar in bacteria and higher plants, therefor we can transfer the genes responsible in production of these compounds to plants in order to obtain transgenic lines tolerant to osmoticstress. In this project we used of gamma radiation which is monochonic and has selective penetrancy to produce mutant strains of Escherichia coli strain MK 148. Salt tolerant colonies were obtained and isolated. The strains were able to tolerate 600 millimolar salt in the media and have normal growth and reproduction; It must have been mutations in gene coding glutamyl kinase (proB) which is the first enzyme in the proline pathway. After this mution, the sensitivity of glutamyt kinase to End-product feedback inhibition has been reduced. The genes of glutamyl Kinase (proB) and glutamic semi- aldehyde dehydrogenase (proA) were isolated by polymerase chain reaction (PCR) from salt- tolerant colonies and cloned in PUC 19. This plasmid was transformed to bacteria, which were unable to biosynthese proline to make them to produce proline as well as to growth in salty media. | ||
| کلیدواژه‌ها [English] | ||
| glutamic semi- aldehyde dehydrogenase, glutamyl kinase, MK 148, osmoprotecors, osmostress, osmotolerance, proA MK14, proB, proline, salt stress, Salt tolerance | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 1,373 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 861 |
||