پیوندهای مفید
اخبار و اعلانات
آمار
| تعداد نشریات | 158 |
| تعداد شماره‌ها | 6,225 |
| تعداد مقالات | 67,685 |
| تعداد مشاهده مقاله | 114,963,658 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 89,637,248 |
روش تراریزش سریع با کارایی بالا در یونجه های دیپلوئید و تتراپلوئید برای تظاهر ژن های Sn بتا – گلو کورونیداز (gus) | ||
| مجله علوم کشاورزی ایران | ||
| مقاله 24، دوره 36، شماره 4 - شماره پیاپی 1463، تیر 1384 اصل مقاله (1.35 M) | ||
| نویسندگان | ||
| سیدمحسن زاده حجازی؛ سیروس عبد میشانی؛ عبدالهادی حسین زاده؛ هوشنگ علیزاده؛ رضا توکل افشاری؛ سرجیو آرچیونی* | ||
| چکیده | ||
| در این مقاله روشی ساده و مؤثر برای باززایی گیاهان تراریخته یونجه چندساله Medicago sativa var. Rgsy27 (2n=4x=32) و یونجه یکساله Medicago truncatula var. R108-1(c4) (2n=2x=16) توسط ژن Sn و ژن گزارشگر gus شرح داده شده است. با اجرای این روش که بستگی به نوع نژاد آگروباکتریوم و ژنوتیپ های مورد استفاده دارد‘ گیاهان تراریخته (transgenic) ایجاد شده با هر نوع هیچگونه تغییری مشاهده نخواهد شد. از عوامل مؤثر کشت مناسب مورد استفاده جهت کال زایی و باززایی ریزنمونه ها‘ نژاد آگروباکتریوم و ژنوتیپ های یونجه مورد استفاده را نام برد. لذا این دستورالعمل مؤثرترین و سریعترین روشی است که برای جنس Medicago بدست آمده است. عمل تراریزش ریز نمونه ها توسط Agrobacterium tumefaciens حامل پلاسمیدهای pBI121.1 ناقل دوتایی ژن gus) و Pbi121.Sn صورت گرفته است. ژنSn یک ژن bHLH در گیاه ذرت است که در مسیر بیوسنتز آنتوسیانین ها و پروآنتوسیانیدین ها (condensed tannins) نقش تنظیم کنندگی دارد. توانایی پرو آنتوسیانیدین ها در تشکیل کمپلکس با پروتئین ها سبب شده که تاثیر زیادی بر ارگانیسم های تجزیه کننده پروتئین و در نهایت کاهش خطر نفخ در حیوانات داشته باشند. از ریز نمونه های حاصل از لاین های Rgsy27 و R108-1(c4) بیش از 90 درصد کالوس های پیش جنین زا تولید شد و بیش از 85 درصد جنین های باززایی شده به گیاه کامل تبدیل شدند. کارایی تراریزش لاین Rgsy27 با نژادهای Agrobacterium tumefaciens مورد استفاده ارتباط داشت‘ در حالیکه در مورد لاین R108-1(c4) این وابستگی وجود نداشت. اثر ژن Sn انتقال یافته به گیاه یونجه در برگها و ریشه ها به دو صورت کاهنده و افزاینده پروآنتوسیانیدین قابل بیان بود. | ||
| کلیدواژه‌ها | ||
| آگروباکتریوم تومفسینس؛ باززایی؛ پروآنتوسیانیدین؛ ژن GUS؛ ژن Sn؛ یونجه | ||
| عنوان مقاله [English] | ||
| - | ||
| چکیده [English] | ||
| A simple and efficient method for regeneration –transformation of two Medicago: the perennial M.sativa var.Rgsy27 (2n=4x=32)and the annual M. truncatula var.R108-1(c4) (2n=2x=16) with Sn and gus genes has been hereby described. Here embryo regeneration of R108-1 to complete plants was further improved by four successive in vitro regeneration cycles resulting in the line R108-1(c4). According to the employed protocol transgenic plants were produced on all leaf explants within 1.5-2 months with the same ploidy levels as before, with their all being fertile. This protocol appears to be the most efficient and fastest reported so far for medicago genus plants. Agrobacterium tumefaciens –mediated transformation of leaf explants was carried out with the plasmid 121.1(Binary vector containing gus gene) and the plasmid 121. Sn was derived from pBI121.1 where the gus gene was replaced with the full length cDNA of Sn. The Sn gene, a maize bHLH gene, modulates anthocyanin and condensed tannin pathways. The functions of CT are due to their ability to form reversible complexes with proteins, the formation of these protein-tannin complexes making protein unavailable for microbial enzyme, activating other mechanisms like deprivation of metal ions and inhibition of oxidative phosphorylation which also result in the prevention of foam formation and bloating. For confirmation of transgenic plants, southern blot, RT-PCR, Enzyme assay and hystochemical assay (DMACA) were used. The efficiency of transformation in Rgsy27 plants was dependent on Agrobacterium strains, in contrast the efficiency of transformation in R108-1 (c4) plants did not depend on Agrobacterium strains. The expression of Sn gene on CT levels in leaves and roots of transgenic plants is either suppressed or unsuppressed. | ||
| کلیدواژه‌ها [English] | ||
| Agrobacterium tumefaciens, Condensed tannins, Medicago sativa, M .truncatula, Plant regeneration, Sn and gus genes | ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 2,004 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1,955 |
||