طراحی، ساخت و انتقال سازههای ژنی جهت خاموشسازی ژنهای F3′5′H و F3′H در انگور رقم شیراز | ||
| علوم باغبانی ایران | ||
| مقاله 1، دوره 46، شماره 1، 1394، صفحه 1-16 اصل مقاله (1.49 M) | ||
| نوع مقاله: مقاله پژوهشی | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22059/ijhs.2015.54120 | ||
| نویسندگان | ||
| مریم پژمان مهر* 1؛ علی عبادی1؛ امیر موسوی2؛ دبرا مک دیوید3؛ آماندا ر. والکر3 | ||
| 1دانشجوی سابق دکتری و استاد، پردیس کشاورزی و منابع طبیعی دانشگاه تهران، کرج | ||
| 2دانشیار پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران | ||
| 3پژوهشگر و استاد مؤسسۀ CSIRO، ادلاید، استرالیا | ||
| چکیده | ||
| بهمنظور مطالعۀ عملکرد ژنهای F3´5´H و F3´H وبرهمکنش آنها در مسیر بیوسنتز فلاونوئیدها در انگور، از طریق طراحی و ساخت سازههای مناسب ایجادکنندۀ ihpRNA، لاینهای تراریخت حاوی سازۀ خاموشکنندۀ ژن F3´H وسازۀ خاموشکنندۀ هر دو ژن F3´5´H و F3´H ایجاد شدند. به این منظور قطعاتی از دو ژن انتخاب و بهصورت تکرارهای معکوس در ناقل pHANNIBAL درج و با بهرهگیری از سیستم ناقل دوگانه، هر یک از سازههای تهیهشده وارد ناقل p27 mod GFP 4a و به اگروباکتری منتقل شد. کالوسهای جنینزای حاصل از کشت پرچم، توسط کشت توأم با اگروباکتری تراریخت شدند. بیان ژن GFP در کالوسهای جنینزا، پنج روز پس از تلقیح با میکروسکوپ مشاهده شد. درنهایت از کشت کالوسهای جنینزای دارای سازۀ خاموشی ژن F3′Hوسازۀ خاموشی همزمانF3′H و F3′5′H بهترتیب 42 و 34 لاین باززایی شدند که براساس واکنش زنجیرهای پلیمراز، 36 لاین برای سازۀ خاموشی ژن F3′H و 27 لاین برای سازۀ خاموشی همزمانF3′H و F3′5′H، مثبت ارزیابی شدند که این نتیجه نشان از کارایی بالای روش باززایی و تراریختی استفادهشده بود | ||
| کلیدواژهها | ||
| خاموشسازی؛ سازۀ ژنی؛ Vitis vinifera؛ F3′H؛ F3′5′H | ||
| مراجع | ||
|
| ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 2,224 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1,596 |
||