انتقال ژنEGFP به کلونی اسپرماتوگونی گوساله به روش لیپوفکسیون | ||
| مجله تحقیقات دامپزشکی (Journal of Veterinary Research) | ||
| مقاله 18، دوره 71، شماره 2، 1395، صفحه 229-236 اصل مقاله (1.68 M) | ||
| شناسه دیجیتال (DOI): 10.22059/jvr.2016.57921 | ||
| نویسندگان | ||
| زهرا فضل الهی1؛ پرویز تاجیک1؛ خسرو حسینی پژوه2؛ گلشید جاودانی شاهدین* 1 | ||
| 1گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهران- ایران | ||
| 2گروه بیوتکنولوژی، سازمان پژوهشهای علمی و صنعتی ایران، تهران- ایران | ||
| چکیده | ||
| زمینه مطالعه: در بالغین، سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی (SSCs) تنها سلولهای بنیادی هستند که قادر به انتقال اطلاعات ژنتیکی به نسل بعد میباشند. با در نظر گرفتن این که یک SSC منفرد میتواند به تعداد زیادی از اسپرماتوزوآ تبدیل شود، دستکاری ژنتیکی این سلولها یک تکنولوژی نوین با کاربردهای عملی در گونههای مختلف حیوانی را مهیا میسازد. هدف: در این مطالعه ارزیابی انتقال ژن (EGFP)رEnhanced Green Fluorescent Protein به کلونیهای اسپرماتوگونی گاوی از طریق حامل لیپوزومی و بهترین روز انکوباسیون در جذب ژن توسط کلونیهای اسپرماتوگونی بررسی شد. روش کار: کارایی انتقال ژن خارجی EGFP به SSCs از طریق Lipofection در سه روز از شروع کشت کلونیهای اسپرماتوگونی (روز4،6 و8) توسط میکروسکوپ فلورسنت ارزیابی شد .توسط رنگ آمیزی ایمنوسیتوفلورسنت علیه مارکرهای OCT4 و Vimentin، ماهیت SSCs و سلولهای سرتولی تأیید شد. نتایج: نتایج نشان داد که کلونیهای ترانسفکت شده از طریق lipofection در هر سه روز انجام ترانسفکشن در مقایسه با گروههای شاهد به طور معنیداری افزایش یافت (0.05>p). کلونیهای ترانسفکت شده در مقایسه با گروههای بدون حامل ژن خارجی نیز بالاتر بود (معنیدار) نرخ آلوده سازی کلونی زمانی که ترانسفکشن در روز 4 کشت انجام شد بود بیشتر بود. نتیجهگیری نهایی: نتایج بدست آمده از این مطالعه پیشنهاد میکند که لیپوفکتامین میتواند به منظور انتقال مستقیم DNA خارجی به کلونی اسپرماتوگونی به ویژه در روز 4 کشت به صورت ایمن به کار رود. | ||
| کلیدواژهها | ||
| ترانسفکشن؛ سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی؛ lipofectamine | ||
| مراجع | ||
|
| ||
|
آمار تعداد مشاهده مقاله: 1,369 تعداد دریافت فایل اصل مقاله: 1,191 |
||